天生酰 胺氮芥对肿瘤细胞有细胞毒感化

  骨髓细胞微核尝试 Logo 尝试道理 ? 微核试验是用于染色体毁伤和干扰细胞有丝的化学毒 物的快速检测方式。 ? 微核(Micronucleus,MCN)是指细胞中从核之外的颗粒,染 色取细胞核分歧,相当于细胞曲径的1/20-1/5,呈圆形或 杏仁状。是细胞内染色体断裂或纺锤丝受影响而正在细胞有 丝时畅留正在细胞核外的遗传物质。 尝试道理 机理: 1 有丝毒物的感化使个体染色体或带着丝点的染色体 环和断片正在细胞后期被畅留正在细胞质中 2 断片或无着丝点染色体正在细胞后期不克不及定向挪动, 从而遗留正在细胞质中 结论: 微核试验能检测化学或其他物质要素发生的染色体 完整性改变和染色体分手改变这两种遗传学起点 有核细胞中 微核难取一般核分叶 及核凸起物区别 微 核 实 验 无核细胞 红细胞 红细胞的分化成熟过程 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的构成 环磷酰胺(CTX) ? 最常用的烷化剂类抗肿瘤药。 ? 正在体外无抗肿瘤活性,进入体内经、分化,生成酰 胺氮芥对肿瘤细胞有细胞毒感化。 ? 副感化较着,有恶心、食欲减退、脱发、白细胞削减、 中毒性膀胱炎、肝功能毁伤等。 ? 具有显著的遗传、生殖毒性:停经或精子缺乏,怀胎初 期时赐与可致畸胎。 ? 用药后24-30小时,骨髓中微核构成达峰。 8 成果 示小鼠骨髓一般 嗜多染红细胞 示小鼠骨髓嗜多染 红细胞中一个微核 9 示小鼠骨髓嗜多染红细胞中两个微核 10 示小鼠骨髓嗜多染红细胞中多个微核 11 Giemsa染色 ? PCE胞质内含 有核糖体,染 色呈灰蓝色; MCN大都为圆 形,嗜色性取 核质分歧,呈 紫红色或蓝紫 色 NCE PCE & MCN ? NCE的核糖体 已消逝,被染 成淡桔红色。 尝试目标 1. 用化疗药(环磷酰胺)制备突变模子 2. 察看小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微 核 尝试动物及试剂 ?【Animal】 小鼠是微核试验的常规动物,凡是用7~12周龄, 体沉18~20g的小鼠。 ?【Reagents 】 小牛血清 Giemsa染液 环磷酰胺 尝试分组和染毒方式 对照组 等体积溶剂 模子组 环磷酰胺40mg/kg 染毒方式(30h两次给药法):两次给受 试物间隔24h,第二次给药后6h取材 处死:小鼠颈椎脱臼处死; 取股骨:防止出血; 取骨髓:小牛血清1滴 推片:30度角; 晾干:必然要干; 固定:甲醇固定10min, 需要晾干; 染 毒 后 操 做 步 骤 染色:Gimesa染液染色(10~15min) 冲刷:蒸馏水冲刷,晾干 阅片: 察看微核。 推 片 方 法 尝试方式和步调 察看取计数:低倍镜下选择分布平均,染色较好的区域 油镜下察看计数 ? 多染红细胞(PCE)呈灰蓝色,正染红细胞(NCE)呈 橘。典型的微核多为单个、圆形、边缘滑腻划一, 嗜色性取核质分歧,呈紫红色或蓝紫色 。 ? 计数1000个PCE中含微核的PCE数,而且计数200个细 胞中PCE取NCE的比值。 微核率(‰)= 含微核PCE细胞数 PCE细胞总数 ×1000 尝试成果 组别 动物数 受检PCE总数 含微核PCE数 微核率 阳性对照组 模子组 成果阐发取评价 ?本试验中只计数PCE中微核,微核率以千分率暗示. ?PCE/NCE为评价细胞毒性的目标: ?一般PCE/NCE比值约为l(一般范畴为0.6~ 1.2); ?如PCE/NCE<0.1,则暗示PCE构成遭到严沉抑 制; ?如PCE/NCE<0.05,则暗示受试化学毒物的剂 量过大,试验成果不靠得住。 Logo

  骨髓细胞微核尝试 Logo 尝试道理 ? 微核试验是用于染色体毁伤和干扰细胞有丝的化学毒 物的快速检测方式。骨髓细胞微核尝试_生物学_天然科学_专业材料。? 微核(Micronucleus,染 色取细MCN)是指细胞中从核之外的颗粒,

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